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全基因組甲基化測(cè)序
技術(shù)簡(jiǎn)介
DNA 甲基化是一種非常重要的表觀遺傳修飾方式,在維持正常細(xì)胞功能、遺傳印記、胚胎發(fā)育以及人類腫瘤發(fā)生中起著重要的作用。全基因組甲基化測(cè)序 (Whole Genome Bisulfite Sequencing, WGBS) 是將重亞硫酸氫鹽處理方法與高通量測(cè)序平臺(tái)相結(jié)合,對(duì)有參考基因組物種的DNA 甲基化狀態(tài)進(jìn)行全基因組范圍內(nèi)檢測(cè),為眾多生物學(xué)過(guò)程、人類健康與疾病的表觀遺傳機(jī)制研究提供強(qiáng)有力的技術(shù)手段。
技術(shù)路線
送樣建議
濃度(Qubit) | 體積 | 總量 | 基因組完整性 |
≥15ng/μL | ≥50 μL | >100 ng | DNA無(wú)明顯降解,無(wú)雜質(zhì)污染 |
技術(shù)參數(shù)
全基因組甲基化測(cè)序 | 測(cè)序策略 | 數(shù)據(jù)量 | 周期 |
HiSeq2500/4000,PE150 | 30X | 50個(gè)工作日起 |
案例分析
單細(xì)胞WGBS 揭示細(xì)胞分化過(guò)程中的表觀遺傳調(diào)控[1]
研究背景
單細(xì)胞基因組測(cè)序和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序熱潮技術(shù)加深了我們對(duì)細(xì)胞異質(zhì)性研究的認(rèn)識(shí),然而單細(xì)胞表觀基因組的研究我們卻知之甚少。
研究目的
本研究證實(shí)WGBS技術(shù)在小細(xì)胞群(μWGBS)和單細(xì)胞(scWGBS)異質(zhì)性表觀遺傳學(xué)研究中的應(yīng)用的可行性,并且提供新的分析思路,為單細(xì)胞甲基化研究打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
研究結(jié)果
通過(guò)對(duì)人和小鼠體內(nèi)單細(xì)胞進(jìn)行WGBS研究,揭示細(xì)胞分化的異質(zhì)性和表觀遺傳修飾的相關(guān)性,并首次繪制人體細(xì)胞scWGBS的甲基化譜。
單細(xì)胞WGBS技術(shù)流程圖
參考文獻(xiàn)
[1]. Farlik, M. et al. Single-cell DNA methylome Sequencing and bioinformatic inference of epigenomic cell-state dynamics. Cell Rep , 2015, 10:1386-1397,doi:10.1016/j.celrep.2015.02.001 .
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